胎牛血清在科研市場(chǎng)上應(yīng)用廣泛相信大家都知道。但對(duì)于胎牛血清的使用及保存，并不是所有人都那么清楚，景源實(shí)驗(yàn)就以胎牛血清的儲(chǔ)存、常見問題及處理方法進(jìn)行分析：
一、如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
未拆封的血清，一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃，在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用，若一次無(wú)法用完一瓶，建議無(wú)菌分裝血清至合適大小的無(wú)菌離心管內(nèi)，再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融，或通過(guò)水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。溶解后建議盡快使用，若長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃，血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。
二、血清中絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理?
1.將冷凍保存的血清取出后，置4℃冰箱靜止過(guò)夜；
2.待血清融化后，上下顛倒，輕輕混勻，繼續(xù)4℃2-3小時(shí)；
3.輕輕吸取上層血清，分裝，余底下50ml左右；
4.低速離心5分鐘，去掉沉淀。
三、若解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該怎么處理?
胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后，也會(huì)存在于胎牛血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將胎牛血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜。
解凍胎牛血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若胎牛血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍胎牛血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。請(qǐng)勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，胎牛血清會(huì)變得混濁，同時(shí)胎牛血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響胎牛血清的質(zhì)量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。
四、如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
1.解凍時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一；
2.分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)；
3.切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍，較大的溫差，易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀；
4.切勿將血清置于37℃過(guò)長(zhǎng)時(shí)間，否則可能使之渾濁，其中一些不穩(wěn)定的組分也會(huì)因此受到影響，最終降低血清的品質(zhì)；
5.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟；
6.若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且保持搖晃均勻。溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。
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